Test Micronucleus Test MNvit do wykrywania aneugenów i klastogenów za pomocą metody FISH – Rapid Micronucleus MoA – OECD 487

Kod produktu: M020. Zawartość: 20 próbek / zestaw

Kod produktu: M100. Zawartość: 100 próbek / zestaw

Rapid Micronucleus MoA to gotowy do użycia zestaw do szybkiej identyfikacji aneugenów i klastogenów zgodnie z OECD 487. Komórki przygotowuje się zgodnie ze standardowymi protokołami według OECD TG 487, a szkiełka są kolejno traktowane serią roztworów dostarczonych w zestawie. „Rapid Micronucleus MoA”, włączając specyficzną dla człowieka, bardzo czułą sondę centromerową i roztwór do barwienia kontrastowego zawierający DAPI (4 ’, 6-diamidyno-2-fenyloindol). Szkiełka są kolejno przemywane PBS i seriami etanolu po obróbce. Następnie do obszaru będącego przedmiotem zainteresowania dodaje się sondy centromerowe i szkiełko ogrzewa się w 80° C przez 3 minuty i przenosi do nawilżanej komory na 20 minut. Przed dodaniem roztworu mocującego następuje płukanie i 5-minutowy etap barwienia kontrastowego.

Używając obiektywu o powiększeniu 40x, będzie można łatwo zidentyfikować mikrojądra i ocenić, czy obecny jest centromer. Zautomatyzowany odczyt i archiwizację można uzyskać za pomocą systemów skanowania slajdów, np. Metafer.

Slajdy są zwykle gotowe do oceny w ciągu 1 godziny. Zastosowanie sond FISH pozwala bezpośrednio rozróżnić mikrojądra powstałe w wyniku utraty chromosomu (związki aneugeniczne) lub pęknięcia (związki klastogenne).

Technologia sondy FISH stosowana w zestawie Rapid Micronucleus MoA może być również stosowana w testach aberracji chromosomowych (OECD 473), analizie cytogenetycznej w badaniach lub w dozymetrii fizycznej, tj. osób narażonych na promieniowanie medyczne lub naturalne.

Częstość mikrojąder jest używana od wielu lat jako biomarker do pomiaru uszkodzeń chromosomów zgodnie z wytycznymi OECD TG487.

Charakterystyka

1-godzinny test FISH – szybka i wiarygodna ocena genotoksyczności

Wysoka specyficzność – brak wyników fałszywie dodatnich z powodu RNA, mikrojąder o niskiej gęstości, osadów, zmian cytoplazmatycznych

Gotowy do użycia zestaw zawierający sondy pan-centromerowe, DAPI i odczynniki

Jednoczesne barwienie kontrastowe DAPI

Szybka i czytelna identyfikacja sposobu działania: Aneugens lub Clastogens

Barwienie centromerów metodą FISH jest zalecane w OECD TG487

Może być stosowany do chemikaliów, farmaceutyków, kosmetyków, próbek środowiskowych

Do wszystkich ludzkich komórek i pełnej krwi

Dostępne także

Frakcja supernatantu S9 po mitochondriach z wątroby szczura indukowanej PB / ß-naftoflawonem, liofilizowana, 1 ml i 2 ml

Referencje

  • Cuceu C, Colicchio B, Jeandidier E, Junker S, Plassa F, Shim G, Mika J, Frenzel M, Al Jawhari M., Hempel WM, O’Brien G, Lenain A, Morat L, Girinsky T, Dieterlen A, Polanska J, Badie C, Carde P, M’Kacher R. 2018. Independent mechanisms lead to genomic instability in Hodgkin lymphoma: Microsatellite or Chromosomal. Cancers (Basel). 10(7).pii:E233. Erratum in: 2019. Cancers (Basel). 11(6).pii:E757.
  • Zaguia N., Laplagne E., Colicchio B., Cariou O., Al Jawhari M., Heidingsfelder L., Hempel WM, Bel Hadj Jrad B, Jeandidier E, Dieterlen A, Carde P, Voisin P, M’Kacher R. 2020. A new tool for genotoxic risk assessment: Reevaluation of the cytokinesis block micronucleus assay using semi-automated scoring following telomere and centromere staining. Mutat Res Gen Tox En. 850-851:503143.